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2025-09-29
任何物质的抗氧化能力都可以通过与Trolox的抗氧化能力相比较而测得。在本方法中定量的单位被定义为“1 g样品中含有1μmol Trolox的抗氧化能力”,用符号TEμmol/g来表示。
在本方法中2,2′-联氮-双(3-乙基苯甲酰胺-6-磺酸)二铵盐(即ABTS)能转化成ABTS+游离基。ABTS+最大UV 吸收在734 nm 处,吸收强度将因抗氧化剂的存在而下降。
(1)溶液配制
①p H 7.4缓冲溶液的配制:准确称取6.8 g磷酸二氢钾和1.6 g氢氧化钠,转入1 000 mL容量瓶中,加入800 m L水,超声至全部溶解。用磷酸和0.1 mol/L氢氧化钠溶液调节p H 至7.4,加水至刻度,摇匀。
②ABTS 溶液的配制:称取384 mg ABTS 和66.5 mg过二硫酸,转入100 m L容量瓶中,加水溶解并定容,摇匀。避光保存24 h。取2 m L该溶液至100 m L容量瓶中,加入p H 7.4缓冲溶液稀释至100 mL,摇匀。
③标准溶液的配制:准确称取74 mg水溶维生素E(Trolox),转入100 mL容量瓶中,加入20 m L水和20 m L乙醇,超声5 min,再加入乙醇至刻度,摇匀,用乙醇稀释25倍。
④样品溶液的配制:称取与标准液浓度相当的样品,转入100 m L容量瓶中,加入20 m L水和20 mL乙醇,超声5 min,再用乙醇稀释至100 mL,摇匀,离心5 min,取清液,用乙醇稀释25倍。
(2)操作顺序
摇匀后,将所有的反应试管放入30℃水浴中10 min。冷却后测UV 在734 nm处的吸收强度。(https://www.chuimin.cn)
(3)结果计算
A:样品液的UV吸收值
As:标准溶液的UV吸收值Ab:空白溶液的UV吸收值V:样品溶液的总体积(m L)Vs:标准溶液的总体积(mL)W:样品的质量(g)
Ws:标准品的质量(g)
250.29:Trolox的相对分子质量106:1 mol转换成1μmol
结果单位:μmol TE/g
TE:Trolox
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