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蜂王浆中10-羟基癸酸和10-羟基癸烯酸的检测方法

【摘要】:10-羟基癸酸和10-羟基癸烯酸被认为是蜂王浆的有效成分,同时也是其标志化合物。测试步骤①标准溶液的配制:准确称取10 mg 10-羟基癸酸和10-羟基癸烯酸标准品,转入100 m L容量瓶中,加入60 m L乙醇,振荡至全部溶解,再加入乙醇至刻度,摇匀即可注射。②样品溶液的配制:称取含有10 mg 10-羟基癸酸或10-羟基癸烯酸的样品,转入100 mL容量瓶中。

10-羟基癸酸(10-hydroxydecanoic acid)和10-羟基癸烯酸(10-hydroxydecenoic acid)被认为是蜂王浆的有效成分,同时也是其标志化合物。

从以上分子结构可以看出这两个化合物都是非极性的,都含有羟基和10个碳的脂肪酸,唯一不同的是10-羟基癸烯酸多了一个双键。两种物质可用反相色谱加UV检测器来测试。

(1)测试步骤

标准溶液的配制:准确称取10 mg 10-羟基癸酸和10-羟基癸烯酸标准品,转入100 m L容量瓶中,加入60 m L乙醇,振荡至全部溶解,再加入乙醇至刻度,摇匀即可注射。

②样品溶液的配制:称取含有10 mg 10-羟基癸酸或10-羟基癸烯酸的样品,转入100 mL容量瓶中。如样品是固体粉末,加入10 mL水,超声5 min,再加入60 m L异丙醇,摇10 min,超声10 min,冷却后用乙醇定容,摇匀,离心后取上层清液即可注射。如样品是液体,加入60 mL乙醇,振荡1 min,再摇10 min,再加入乙醇至刻度,摇匀后过滤,取清液即可注射。

(2)UPLC条件

色谱柱:Acquity UPLC®BEH Phenyl,1.7μm,2.1×150 mm

流速:0.4 mL/min

注射量:2μL

UV检测波长:210 nm

移动相A:0.1%磷酸水溶液

移动相B:乙腈

柱温:45℃

梯度

图5- 7 10-羟基癸酸的色谱图

图5- 8 10-羟基癸烯酸的色谱图

(3)结果计算

A:10-羟基癸酸标准品的峰面积

A:样品液中10-羟基癸酸的峰面积

V:样品液的总体积(m L)

V:标准液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :标准品的质量(mg)

10-羟基癸烯酸计算公式同上。