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2025-09-29
植酸(IP6)有广泛的用途,如食品行业中在油脂中加入植酸后可阻断氧化链,延长货架周期;在保健品行业中可作为癌症病人术后的保健品。
植酸是一个多价酸,在反相色谱中很难得到一个对称的峰,峰形往往会很宽,严重拖尾,甚至不能完全洗脱。同时植酸分子没有特征性的UV 吸收,所以不能用UV检测器。这里介绍一个用反离子色谱-MS/MS来测试植酸的方法。
如上所述,反相色谱或离子色谱都很难得到一个完美的峰,因为植酸是一个多价酸。但是用反离子色谱,即用阳离子交换柱而不是用阴离子交换柱(见第1章“仪器介绍”),用同性相斥的原理把植酸离子排斥出去,这样植酸峰保留时间是负的,也就是比中性的溶剂峰出来得还早。
由于植酸的酸度及价数与其他阴离子不同,被推斥的强度不同,所以出峰时间可能与其他阴离子不同。重要的是得到了一个对称的、可用作定量测试的峰。当然这个峰的纯度如何,是否与其他阴离子完全分开是一个问题,但高选择性的MS/MS解决了这个问题。
(1)测试步骤
①标准液的配制:准确称取25 mg植酸标准品,转入100 m L容量瓶中,加入60 mL水,再加入1 mL 1∶5盐酸,超声2~5 min直到全部溶解,再加水至刻度,摇匀。进一步用水稀释以得到1 ppm、5 ppm、25 ppm 3个不同浓度的标准液。
②样品液的配制:称取一定量含有相当于25 mg植酸的样品,转入100 m L容量瓶中,加入60 m L水及1 mL 1∶5盐酸,超声5 min,再加水至刻度,搅匀,离心,取上层清液,进一步稀释至约5 ppm。
(2)离子色谱条件
色谱柱:Dionex IonPac CS14,4×250 mm
流速:0.8 m L/min
移动相A:0.1%甲酸水溶液
移动相B:乙腈(https://www.chuimin.cn)
移动相A∶移动相B=90∶10
MS/MS的参数:
(3)结果计算
注射3个不同浓度的标准液,建立工作曲线。
检查样品添加液的回收率,若回收率在控制范围内(见第1章“LC-MS/MS的定性及定量测试”),则按以下公式计算。
C样:样品的浓度(ppm),输入样品的总离数(TIC),从工作曲线上找到相应的浓度
V样:样品溶液的总体积(mL)
W 样:样品的质量(mg)
1 000:微克转换到毫克
R:样品添加液的回收率MS/MS的定性及定量测试”的步骤来进行。
若回收率超出控制范围,则按第1章“LC-
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