阿魏酸是酸性化合物，溶解于水，当溶液的p H 大于5时显负性。图4-54四己基氯化铵和阿魏酸互相吸引形成离子对测试步骤①标准液的配制：准确称取10 mg阿魏酸标准品，转入100 m L容量瓶中，加入60 m L水，超声2 min，再加水至刻度，摇匀后即可注射。②样品液的配制：称取一定量碾碎的含有约10 mg阿魏酸的样品，转入100 mL容量瓶中，加入60 mL水，超声10 min，冷却后再加水至刻度，摇匀，离心5 min，吸取清液即可注射。......
2025-09-29
如何测试胆汁酸？
【摘要】：从以上分子结构可以看出胆汁酸都是非极性化合物，可以用C18柱来分离和定量测试。测试步骤①标准液的配制：以上每种胆汁酸分别准确称取10 mg，转入50 mL容量瓶中，加入30 mL甲醇，振荡2 min，水浴超声至全部溶解，冷却后再加入甲醇至刻度，摇匀后即可注射。
胆汁酸有两大类，一类是共轭胆汁酸（conjugated bile acids），有牛黄胆汁酸（taurocholic acid）、牛黄鹅胆汁酸（taurochenodeoxycholic acid）、牛黄去氧胆酸（taurodeoxycholic acid）、甘氨胆酸（glycholic acid）、甘氨鹅去氧胆酸（glycochenodeoxycholic acid）；另一类是非共轭胆酸，有胆酸（cholic acid）和去氧胆酸（deoxycholic acid）等。
从以上分子结构可以看出胆汁酸都是非极性化合物，可以用C18柱来分离和定量测试。
（1）测试步骤
①标准液的配制：以上每种胆汁酸分别准确称取10 mg，转入50 mL容量瓶中，加入30 mL甲醇，振荡2 min，水浴超声至全部溶解，冷却后再加入甲醇至刻度，摇匀后即可注射。
②样品液的配制：称取一定量相当于含有约10 mg胆酸的样品，转入50 mL容量瓶中，加入5 mL水，振荡2 min，超声5 min，再加入30 mL乙醇，超声10 min，冷却后加入甲醇至刻度，摇匀，离心10 min，取上层清液即可注射。
（2）UPLC条件
色谱柱：Acquity UPLC®BEH C18，1.7μm，2.1×150 mm
流速：0.4 mL／min
注射量：2μL
UV检测波长：210 nm
移动相A：0.1%磷酸水溶液
移动相B：乙腈(https://www.chuimin.cn)
柱温：45℃
梯度：
（3）结果计算
A标：相应标准品的峰面积
A样：相应样品的峰面积
V样：样品液的总体积（m L）
V标：标准液的总体积（m L）
W 样：样品的质量（mg）
W 标：相应标准品的质量（mg）
总胆汁酸为所有单独的胆汁酸的总和。
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