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2025-09-30
胚乳培养(endosperm culture)是指将胚乳组织从母体上分离出来,通过离体培养,使其发育成完整植株的技术。
裸子植物中胚乳是由雌配子体发育而成的,是单倍体。
被子植物中胚乳一般是双受精的产物,是由两个极核和一个雄配子融合而成的三倍体。
(一)培养方法
1.胚乳外植体的选取
将整个果实(槲寄生植物)或种子进行表面消毒,在无菌条件下切开幼果及种子,小心分离胚乳,将其接种在培养基上培养。
2.胚乳愈伤组织再生植株
(1)愈伤组织的诱导。除少数植物可以直接从胚乳分化出器官外,大多数被子植物的胚乳,无论成熟与否,都首先形成愈伤组织,然后分化形成植株。
(2)器官发生途径。器官发生型和胚胎发生型均有。由被子植物胚乳组织培养发育成的植物一般是三倍体植物。
3.三倍体后代的特征
(1)形态特征:粗壮,叶片大而肥厚,叶色浓,花形大或重瓣,果实大但结实率低。
(2)胚乳再生植株的倍性。在胚乳培养中常常发生染色体倍性混乱的现象,即多数胚乳培养具有多种数目的染色体细胞。
黄贞光等(1982)报道,来源于猕猴桃同一植株的胚乳,激素影响倍性,在ZT 3 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基上多数是二倍体植株,在ZT 3 mg/L+2,4-D 1 mg/L培养基上则为三倍体植株。
(3)影响胚乳细胞在培养中染色体稳定性的因素:胚乳的类型、胚乳愈伤组织发生的部位(合点端还是珠孔端)、培养基中外源激素的种类和水平。
(二)影响胚乳培养的因素(https://www.chuimin.cn)
1.培养基与培养条件
(1)常用的基本培养基有MT、LS、MS等。
(2)添加有机物,如在培养基中加水解酪蛋白和酵母提取物,能促进愈伤组织的产生和增殖。
(3)激素。培养基中不加激素,不能形成愈伤组织。同时加入细胞分裂素和生长素,愈伤组织正常生长,其效果显著优于使用单一的生长素或细胞分裂素。
(4)蔗糖的浓度一般为3%~5%。
(5)适宜培养温度为25℃左右。光照、pH因物种不同而异。
2.胚在胚乳培养中的作用
胚乳培养分为带胚培养、不带胚培养两种方式。
(1)带胚培养胚乳比不带胚培养胚乳容易形成愈伤组织,当愈伤组织形成后,除去胚并不影响胚乳组织的增殖。
(2)未成熟胚乳,在诱导培养基上没有胚的存在就能形成愈伤组织。而成熟的胚乳,必须借助胚的萌发使愈伤组织活化。
(三)胚乳培养的应用
1.三倍体幼苗和植株的获得。被子植物的胚乳是三倍体,三倍体植株产生无子果实,食用方便,或将其加倍成六倍体,在生产中有重要的应用价值。生产中,苹果、香蕉、桑树、西瓜、甜菜、茶及某些花卉的三倍体经济性状更优越。
2.胚乳植株染色体具有不稳定性,可以从中分离和筛选出各种类型的非整倍体植株,为染色体工程的研究提供有效的途径。
3.为研究淀粉、蛋白质和脂肪等产物的生物合成及其代谢提供良好的实验系统。
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